亚洲综合精品第一页,午夜精品久久久久久久69堂,好男人在在线社区WWW在线影院,免费爽爽看片在线看片

產(chǎn)品列表PRODUCTS LIST

首頁 > 技術(shù)與支持 > 實(shí)驗(yàn)提取質(zhì)粒DNA方法
實(shí)驗(yàn)提取質(zhì)粒DNA方法
點(diǎn)擊次數(shù):1368 更新時(shí)間:2019-12-27

提取質(zhì)粒DNA的方法有很多種,從提取產(chǎn)量上分可分為微量提取、中量提取、大量提取,從使用儀器上分可分為一般提取和試劑盒方法提取,從具體操作方法分可以分為堿裂解法、煮沸法、牙簽法等,各種不同的方法各有其優(yōu)缺點(diǎn),根據(jù)不同的實(shí)驗(yàn)?zāi)康目梢圆捎煤线m的提取方法。

堿裂解法:人們使用堿與SDS裂解法從E. coli(大腸桿菌)中分離制備質(zhì)粒DNA已有30多年的歷史。將細(xì)菌懸浮液暴露于高pH值的強(qiáng)陰離子洗滌劑中,會使細(xì)胞壁破裂,染色體DNA和蛋白質(zhì)變性,將質(zhì)粒DNA釋放到上清中。盡管堿性溶劑使堿基配對*破壞,閉環(huán)的質(zhì)粒DNA雙鏈仍不會彼此分離,這因?yàn)樗鼈冊谕負(fù)鋵W(xué)上是相互纏繞的。只要OH-處理的強(qiáng)度和時(shí)間不要太過,當(dāng)pH值恢復(fù)到中性時(shí),DNA雙鏈就會再次形成。

質(zhì)粒DNA煮沸法:是將細(xì)菌懸浮于含有Triton X-100和能消化細(xì)胞壁的溶菌酶的緩沖液中,然后加熱到100℃使其裂解。加熱除了破壞細(xì)菌外壁,還有助于解開DNA鏈的堿基配對,并使蛋白質(zhì)和染色體DNA變性。但是。閉環(huán)質(zhì)粒DNA鏈彼此不會分離,這是因?yàn)樗鼈兊牧姿岫ス羌芫哂谢ハ嗬p繞的拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)。當(dāng)溫度下降后,閉環(huán)DNA的堿基又各就各位,形成超螺旋分子,離心除去變性的染色體DNA和蛋白質(zhì),就可從上清中回收質(zhì)粒DNA。煮沸裂解法對于小于15kb的小質(zhì)粒很有效,可用于提取步至lmL(小量制備),多至250mL(大量制備)菌液的質(zhì)粒,并且對大多數(shù)的大腸桿菌菌株都適用。
質(zhì)粒小提試劑盒:用于大腸桿菌中質(zhì)粒DNA的小量提取,它結(jié)合了優(yōu)化的堿裂解法,以及方便快捷的硅膜離心技術(shù),具有高效,快捷的特點(diǎn),能在30min內(nèi)完成全部操作。利用試劑盒能從1-5mL過夜培養(yǎng)的大腸桿菌菌液中純化得到10-40μg高質(zhì)量的質(zhì)粒DNA(OD260/OD280=1.7-1.9),此質(zhì)粒DNA可直接用于DNA序列分析,各種酶促反應(yīng),PCR以及部分細(xì)胞系的轉(zhuǎn)染等。

 

免费观看欧美一区二区三区| 精品亚洲成AV人在线观看| 久久久中文字幕人妻一区| 亚洲欧美中文字幕天美| 亚洲中文字幕无码超碰| 姝姝天堂2旧里番在线观看| 精品久久久久久99人妻| 久久久婷婷成人综合激情| 国产97视频精品免视看7| 欧美日韩国产一区二区精品| 日韩永久免费进入2015| 狠狠色丁香久久婷婷综合蜜芽五月| 久久狼人大香伊蕉国产| 精产国品一二三产区999999| 一本一道久久A久久精品综合| 国产在线拍揄自揄拍无码| 亚洲AV无码国产一区二区| 亚洲欧美性都花花世界爱爱网| 亚洲区小说区激情区图片区 | 女人和拘做受A级毛片| 久久国产成人精品国产成人亚洲| 少妇的滋味完整版| 欧美人与性动交α欧美精品| 911亚洲精品第一| 日韩中文理论电影| 欧美日韩国产成人一区| 野花影视大全在线观看免费高清1| 久久久久久久久久久精品| 亚洲国产日韩在线人高清| 久操精品视频| 么公又大又硬又粗又爽的视频| 啦啦啦视频免费播放完整版| 久久久久久久久束缚| 麻豆国产在线精品国偷产拍| 久久99精品久久久久久HB| 极品激情视频一区二区三区| 欧美大片无需播放器久久| 亚洲AV无码专区在线电影天堂| 亚洲欧美国产中文字幕| 成在线人免费视频播放限制| 亚洲AV无码国产精品色午夜|